其实BCA是检查什么的问题并不复杂,但是又很多的朋友都不太了解BCA是检查什么,因此呢,今天小编就来为大家分享BCA是检查什么的一些知识,希望可以帮助到大家,下面我们一起来看看这个问题的分析吧!
本文目录:
BCA蛋白浓度检测的实验试剂
Bicinchoninic acid (BCA )法是在世界上常用的蛋白浓度检验方法之一BCA法基础上改进而成。其原理与Lowery法蛋白定量相似,即在碱性环境下游闭裂蛋白质与Cu 2+ 络合并将Cu 2+ 还原成Cu + 。两分子BCA与一个Cu + 螯合形成稳定的紫蓝色复合物,在562 nm处有高的光吸收值并与蛋白质浓度成正比,据此可测定蛋白质浓度。
组成与储存:
组分名称 规格 保存
BCA Reagent 100ml 2-8℃
Cu Reagent 3.0ml 2-8℃
BSA标准液5 mg/神闭ml 1ml -20ºC冻存
可进态迅行500T微板(microplate)测定或50T2ml比色杯测定。
免疫组化BCA法是什么意思?
Bicinchoninic acid (BCA )法是近来广为应用的蛋白定量方法。清咐族其原理与Lowery法蛋白定量相似,即在碱性环境下蛋白质与Cu2+络合并将Cu2+还原成Cu1+。简闷BCA与Cu1+结合形成稳定的紫蓝色复合物,在562 nM处有高的光吸收值并与蛋白质浓度成答弊正比,据此可测定蛋白质浓度。与Lowery法相比,BCA蛋白测定方法灵敏度高,操作简单,试剂及其形成的颜色复合物稳定性俱佳,并且受干扰物质影响小。与Bradford法相比,BCA法的显著优点是不受去垢剂的影响。
器材
1. 7220型分光光度计
2. 比色杯
3. 恒温水浴箱
4. 中试管7支
5. 枪式移液管
试剂
1. 试剂A: 1%BCA二钠盐
2%无水碳酸钠
0.16%酒石酸钠
0.4%氢氧化钠
0.95%碳酸氢钠
混合调PH值至11.25。
2. 试剂B:4%硫酸铜。
3. CA工作液:试剂A?100ml?+?试剂B?2ml混合。
4. 蛋白质标准液:用结晶牛血清白蛋白根据其纯度用生理盐水配制成1.5mg/ml的蛋白质标准液。(纯度可经凯氏定氮法测定蛋白质含量而确定)
5. 待测样品:用双缩脲测定法的样品稀释而成。
具体可参照
蛋白质检测剂用来干什么
BCA蛋白质定量检测试剂盒是进行蛋白质浓度测定的最常用试剂盒
bca法是什么意思
BCA 蛋白定量法,即Bicinchoninic acid
BCA 蛋白定量法是实验室常用的蛋白质定量方法。Invent 所有蛋白提取试剂盒提取的蛋白均可使用 BCA 法进行定量
BCA 法原理
碱性条件下,蛋白将 Cu2+还原为 Cu+,Cu+与 BCA 试剂相互作用形成紫色的络合物,该水溶性的复合物在 562nm 处显示强烈的吸光性,吸光度和蛋白浓度在广泛范围内有祥纳拍良好的线性关系,因此根据吸光值可以推算出蛋白浓度。
实验操作具体步骤
1. 梯度稀释牛血清白蛋白(BSA)标准品(具体操作按试剂盒中说明操作)
2. 制备 BCA 工作液(具体操作按说明书进行)
3. 将各个稀释浓度的蛋白质标准品和待测蛋白质样品加入到微孔板或试管中,谨羡分别加入 BCA 工作液(比例参照试剂盒说明书)混匀。
4. 密封后,37℃ 保温 30-60 min
5. 冷却到室温茄凳,以空白为对照,测量样品在 562nm 或该波长附近的吸光值
6. 将各个标准品和待测蛋白质样品在 562nm 处的吸光值减去空白标准品在 562nm 处的平均吸光值。
血液检查中的BCA是什么意思?
原理简介
BCA(bicinchoninic acid)法蛋白浓度定量试剂盒是在世界上常用的蛋白浓度检测方法之一BCA法基础上改进而成。众所周知,二价铜离子在碱性的条件下,可以被蛋白质还原成一价铜离子(biuret reaction),一价铜离子和独特的BCA Solution A(含有BCA)相互作用产生敏感的颜色反应。两分子的BCA螯合一个铜离子,形成紫色的反应复合物。该水溶性的复合物在562nm处显示强烈的吸光性,吸光度和蛋白浓度在广泛范围内有良好的线性关系,因此根据吸光值可以推算出蛋白浓度。
产品特点
1.步骤简单,45分钟内完成测定,比经典的Lowry法快4倍而且更加方便。
2.灵敏度高,检测浓度下限达到25μg/ml,最小检测蛋白量达到0.5μg,待测样品体积为1-20μl 。
3.BCA法测定蛋白浓度不受绝大部分样品中的去污剂等化学物质的影响,可以兼容样品中高达5%的SDS,5%的Triton X-100,5%的Tween 20, 60, 80。
4.在20-2000μg/ml浓度范围内有良好的线性关系。
5. 检测不同蛋白质分子的变异系数远小于考马斯亮蓝法蛋白定量。
BCA蛋白质定量检测试剂
在蛋白质的表达纯化,结构和功能的研究工作中,蛋白质的定量随处可见。但是,什么是理想的蛋白质定量方法?如何准确、快速的对蛋白质进行定量,对于不同的样本,如何选取相应的蛋白质定量试剂和方案?如汪肆何避免实验中引入的其它物质对蛋白质定量的干扰,PIERCE为这一切提供了可以信赖的解决方案。
PIERCE的BCA(bicinchoninic acid)蛋白质检测试剂是当前比Lowry法更优越的专用于检测总蛋白质含量的产品。该方法以快速灵敏、稳定可靠且对不同种类蛋白质变异系数甚小而深受专业人士的青睐。其中MicroBCA产品可检测到0.5μg/ml的微量蛋白,是目前已知的最灵敏的蛋白质检测试剂之一。
主要特点:
· 准确灵敏:BCA试剂的蛋白质测定范围是20-2000μg/ml,采用加强宽悄方法可检测到
5μg/ml;MicroBCA试剂测定范围是0.5-20μg/ml。
· 快速:45分钟内完成测定,比经典的Lowry法快4倍而且更加方便。
· 经济实用:除试管外,测定可在微孔板中进行,大大节约样品和试剂用量。
· 不受样品中离子型和非离子型去污剂影响。
· 检测不同蛋白质分子的变异困巧轿系数远小于考玛斯亮蓝。
基本原理:
碱性条件下,蛋白将Cu++还原为Cu+, Cu+与BCA试剂形成紫颜色的络合物,测定其在562nm处的吸收值,并与标准曲线对比,即可计算待测蛋白的浓度。
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