一休：本名千菊丸，是日本幕府时期小松天皇的儿子，由于战乱被母亲从小送进安国寺修行，法名一休宗纯。因从小智慧过人名扬天下而并非他的历史渊源。本性善良，乐于助人，而且同样具有小孩子的顽皮和狡猾，在全片中亦是正义的化身。
小叶子：居住在安国寺附近的小女孩，活泼可爱，心地善良，和爷爷相依为命，经常出入安国寺，对一休有一份真挚特殊的感情。
蜷川新佑卫门：日本武士兼地方官，武艺高强，剑术超群，同样是正义的代表，严肃起来大义凛然，威严无比，不严肃时又象个小孩子那样顽皮风趣。开始对一休也很不友好，但多次见识一休的智慧后而对他完全信服了并拜一休为师，与其说他是将军的侍卫倒不如说他是一休的左膀右臂，而且多次救了一休的命，一休再智慧，毕竟是个孩子，手无缚鸡之力，如果遇到蛮横、不讲道理、恃强凌弱、耍无赖之徒，这时候只有让新佑卫门的刀去说理了。所以他和一休一起才称得是上文武智勇双全的完美组合。
足利义满将军：就是个大孩子，性情喜怒无常，自身养尊处优、四体不勤、五谷不分，而且经常提很多无理要求为难下属和百姓。虽为将军，但武艺和智谋好象都不怎么样，打猎没有新佑卫门为讨他高兴暗中帮忙就什么也射不到，妒忌一休的智慧(甚至怕一休威胁到他而想杀掉一休)，但有事又要求助一休来挽回面子。如果不是贵为统治者，其实就是个废物，从他隐藏身份去民间那集就能看的很清楚。
弥生小姐：桔梗店老板的女儿，有钱人家的大小姐，为人傲慢、骄横，和父亲一起总是以各种方式刁难一休，遇到困难又总是来哀求一休帮忙。最大的乐趣就是看到一休出丑。
长老：本名外鉴，是安国寺的主持，德高望重，慈悲为怀，对弟子要求十分严厉。
一休的母亲，出身名门旺族，小松天皇的妃子，因战乱逃离宫中，生下一休，取名千菊丸，并送入安国寺修行，且不允许一休见她;83版中，一休来找妈妈送蛤蜊油时，她却不愿开门相见，多次后连侍女阿春都不忍而落泪……一次一休终于见到了妈妈，妈妈却要赶他走，一休心灰意冷，在那个风雨交加的夜晚，一休独自乘小船在琵琶湖上颠簸准备一死了之，后被人所救，至此一休才和忏悔的母亲团聚。
