大家好,今天本篇文章就来给大家分享多克隆抗体有哪些应用,以及多克隆抗体有哪些应用领域对应的知识和见解,内容偏长哪个,大家要耐心看完哦,希望对各位有所帮助,不要忘了收藏本站喔。
、人工制备抗体制备方法有哪些?
1、人工制备抗体是获得大量抗体的重要途径。制备方法有按常规动物免疫方法获得的多克隆抗体,用杂交瘤技术制备的单克隆抗体和近年来发展的基因工程抗体法。
2、通过质谱法/RT-PCR/RAC等方法对可变区的进行序列分析,获得重轻链可变区基因序列。
3、制备单克隆抗体常用的诱导剂有:化学诱导剂——聚乙二醇(PEG)、生物诱导剂——灭活的病毒(常用灭活的仙台病毒)。
4、用具备这种特性的单个杂交瘤细胞培养成细胞群,可制备针对一种抗原表位的特异性抗体,即单克隆抗体。单克隆抗体是人工制备的杂交瘤细胞生产的,杂交瘤细胞是由一个经抗原激活后的B细胞与一个骨髓瘤细胞融合形成。
5、传统方法免疫动物制备抗体:将通过各种方法获得的免疫原(抗原)注射至动物(比如大鼠、小鼠和兔等)体内,刺激动物体内B细胞分化成熟,产生、分泌抗体,再通过收集动物血清,分离纯化而获得成品抗体。
6、杂交瘤阳性克隆的筛选与克隆化 采用灵敏、快速、特异的免疫学方法,筛选出能产生所需单克隆抗体的阳性杂交瘤细胞,并进行克隆扩增;单克隆抗体的大量制备 单克隆抗体的大量制备一般采用动物体内诱生法和体外培养法。
、多克隆抗体技术的佐剂的应用
1、.检验医学诊断试剂 作为检验医学实验室的诊断试剂,单克隆抗体以其特异性强、纯度高、均一性好等优点,广泛应用于酶联免疫吸附试验、放射免疫分析、免疫组化和流式细胞仪等技术。
2、用剪刀剪去家兔两后脚掌的部分兔毛,以酒精及碘酒消毒皮肤; 第一次免疫: 用2ml注射器吸取弗氏完全佐剂(FCA)乳化的抗原(人IgG)下称FCA-IgG)液1ml,每侧脚掌皮下各注入0.5ml。
3、可以采用以下各种方法之一进行免疫。(1)淋巴结注射法:①在兔的两后足跖部皮下(或皮内)注射活卡介苗 50mg(每侧约0.30ml) 。
、多克隆抗体与单克隆抗体有什么差异
1、 单克隆抗体由单个B细胞亲本克隆产生,因此,只能识别单个抗原的特定的一个表位。单克隆抗体对靶向的抗原表位具有高度特异性,非特异性交叉反应性低,批间变异小。优点:a.不易产生批次间差异。
2、单克隆抗体由同一株B细胞克隆分泌,编码该抗体的基因序列完全一致。只识别单一抗原表位。多克隆抗体则是混合体,有动物体内所有可识别该抗原的B细胞分泌。可识别该抗原上的不同抗原表位。
3、解析:单克隆抗体是一个抗原表位刺激一个B细胞克隆增生而产生的单一抗体,而多克隆抗体是一种抗原的多个表位刺激多个B细胞克隆增生而产生的多种抗体混合物,所以前者比后者特异性要强得多 。
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