传说巫女可以接受神的凭依，传达神的意志，同时巫女也担任着祈祷、驱邪、祭祀等职务，她们通常都具有不弱的灵力，是妖怪畏惧的存在。在《犬夜叉》中，就有不少巫女的存在，而以下5位巫女，就拥有很强的灵力，是巫女中的佼佼者。
翠子
翠子可以说是《犬夜叉》中最强大的巫女，拥有净化妖怪灵魂的强大力量。因为翠子的关系，那个时期强大的妖怪几乎全部死伤殆尽，因此巫女也成为战国时期最受平民尊敬的一个职业。但正是因为翠子太过于强大，导致那个时期众多妖怪联合起来偷袭她，翠子苦战七天七夜，消灭无数妖怪之后，因为精疲力尽而身亡。
临死前她用自己最后的力量，将所有妖怪的灵魂拉出体外，想要将它们净化，可惜此时翠子的灵魂也达到了极限，她的灵魂与妖怪们的灵魂纠缠在一起，就诞生了四魂之玉，翠子的灵魂和妖怪的灵魂仍然在不停地战斗。
桔梗
桔梗的出现惊艳了众人，她是一位美丽而强大的巫女，负责守护和净化四魂之玉，拥有十分强大的灵力，会使用精准的箭术，不停地击退对四魂之玉虎视眈眈的妖怪们。犬夜叉想要得到四魂之玉的力量变成完全的妖怪，却在与桔梗的战斗中爱上了桔梗，但是奈落却用计使他们反目成仇，其实桔梗更想做一个普通人，最后和犬夜叉吻别，化为光点而去。
戈薇
戈薇是桔梗的转世，因为落入食骨井而穿越到了战国时代，她的灵力甚至比桔梗还要强，也拥有桔梗的净化之力，还用项链将犬夜叉制得服服帖帖的。但是戈薇对自身力量的使用，还是不如桔梗，毕竟她是从现代穿越过去的，没有受过巫女专业的培训，但她依然在战斗中发挥了巨大的作用，并且在犬夜叉的支持下领悟并许下正确的愿望，消灭了四魂之玉，翠子的灵魂也终于得到了解脱。
瞳子
瞳子是一位被公认灵力足以媲美桔梗的巫女，她的一生都在履行自己的使命，但她却被奈洛害死又将她复活并操控，让她成为犬夜叉队伍的敌人，最后被戈薇的灵力净化并得到解脱，是让戈薇知晓自己天生的灵力来源与被封印的人。
奏姬
奏姬是守护蓬莱岛的巫女，她的灵力应该很强，蓬莱岛上的妖怪、半妖、人类都相处得十分融洽，但是由于半妖不被世人接受，奏姬为了永远的保护他们，所以用灵力张开了时之结界，将蓬莱岛与外面隔离开来，一般情况下妖怪都无法突破结界，在蓬莱岛每五十年一次的结界会变弱的时机，四斗神趁机袭击了蓬莱岛，奏姬只能以生命为代价夺走了他们的力量，并封印在玉之匣中，随后跳入了身后的鸣动之熔炉，用仅剩的一点灵魂继续封印着这份力量。
